色谱柱知识点1

一一

1ppm=1*10的-6次方g/ml
1bar=0.1MPa=14.5psi
1Å=10的负十次方米=0.1nm
1英寸（符号”）=25.4mm    peek管外径1/16英寸=0.06英寸=1.6mm，内径0.007英寸=0.18mm
10-32螺纹：公称直径是4.826mm，32代表1英寸的距离里螺纹有32个牙，即螺距=1/32"=0.7975mm
THF（四氢呋喃）  异丙醇(IPA)
常用反相填料：C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)，还有 C12, C5,  C2, C1, PFP, CN, NH2等



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• Kinetex ™ 色谱柱的柱温上限为60℃。在25℃以上操作可以降低流动相粘度和背压，并且提高传质率以及增强选择性。在高pH值(>8)操作时，降低运行温度可帮助延长柱寿命。在柱温上限或接近柱温上限操作会导致柱寿命缩短。
• 色谱柱几天不用时，应保存在≥50%(v/v)乙腈/水或甲醇/水中。如果流动相含缓冲盐，保存前请先用10至20倍柱体积的水/乙腈或水/甲醇冲洗色谱柱以去除缓冲盐。冲洗色谱柱后请用柱塞头旋紧色谱柱，以防保存溶剂挥发和柱床变干。
• 硅胶色谱柱对pH值敏感。低pH值(< 2.0)会水解键合相（官能团解离），而高pH值(> 8.0)又会溶解硅胶。如果流动相的pH值接近2.0或8.0，那么请使用预饱和色谱柱。
  

预柱和保护柱
预柱主要组成部分就是筛板，很多地方译为在线过滤器，材质一般为不锈钢，孔径一般为2um，成分主要是SI填料，保护柱组成一般为与分析柱相同填料、内径的一段10mm左右的短柱子；
预柱是保护分析柱减少流动相的影响；保护柱是保护分析柱减少样品的影响。



色谱柱装填
一、网络
4.6m色谱柱装填时，首先将色谱柱管一端卸开，将其接入高压气动泵的末端。然后在过量的色谱硅胶中加入适量的乙醇，充分浸泡后制成混悬液，将其倒入气动泵的匀浆灌。实验中以高压氮气作为压力载气，以工业乙醇为载液，控制气动泵末端压力在15MPa，待压力稳定后保持该压力30min以上后缓慢降低压力至常压。将色谱柱轻轻取下，尽量保持其无剧烈晃动，最后加入相应的筛板及端头组装即可。
二、纳微反相色谱填料说明书
1.匀浆液浓度指填料沉降至体积恒定后的体积比上匀浆液的总体积。
推荐异丙醇为匀浆溶剂，匀浆液浓度为50-60%
2.配置匀浆液浓度的方法
2.1.匀浆液浓度指填料沉降至体积恒定后的体积比上匀浆液的总体积。本产品选用异丙醇为匀浆溶剂，匀浆液浓度为50%-60%
2.2配置匀浆液浓度的方法
首先计算所装色谱柱的柱体积Vc，然后计算该体积所需填料的质量m，按照下列公式计算：
Vc=h×πr2  m=ρ×Vc，其中，Vc：色谱柱体积；h：色谱柱高度；r：色谱柱半径；ρ：填料堆积密度。
为获得紧密的柱床，填料质量应为所需填料m的1.05-1.10倍。

• 准备好色谱柱，总的柱体积应该足够把匀浆液一次倒入。
• 使用洗瓶或倒流的方法将色谱柱底部的筛板用匀浆液溶剂润湿，并关掉色谱柱出液口阀门，在色谱柱底部保留1-2cm高的液体。
• 重新搅动匀浆液，确保其分散均匀。
• 把匀浆液慢慢倒入色谱柱中，防止混入气体。
• 待匀浆液完全转移到色谱柱，用装有匀浆溶剂的洗瓶冲洗色谱柱内壁。