C18高效液相色谱柱高pH值耐受性的测定

一一

来源：GB/T32268-2015十八皖基键合相(C18) 高效液相色谱柱性能测定方法

7.13 高pH值耐受性的测定

7.13.1三乙胺水溶液的配制

量取500.0mL水，用三乙胺调节其pH值至所需数值。该数值为待测C18 HPLC柱说明书上所宣传的适用pH值范围的上限值 。

7.13.2氢氧化钠水溶液的配制

量取500.0mL水，用氢氧化钠调节液(4.21)调节其pH值至所需数值。该数值为待测C18 HPLC柱说明书上所宣传的适用pH值范围的上限值。

7.13.3老化条件

老化流动相根据不同的pH值范围进行配制：

a) 当pH值为9.0~12.0时，流动相为甲醇：三乙胺水溶液=40:60（体积分数）；

b) 当pH值为12.0~ 14.0时，流动相为甲醇：氢氧化钠水溶液=40:60（体积分数）；

柱温：50°C ;

流速：参考附录A。

7.13.4高pH值耐受性的柱效测定

见7.10柱效测定。

7.13.5测定步骤

按7.10的柱效测试方法预先测试一只C18HPLC柱的柱效。然后按7.13.3的条件老化该C18 HPLC柱，每隔24h，按照7.10柱效测定的方法测定该色谱柱的柱效。

每次进行柱效测定时，需重复测定3次，取测定结果的平均值。以24h为单位，根据每个时间点的测定结果绘制出一个萘色谱峰的保留时间、拖尾因子及柱效随着老化时间的变化曲线图，即高pH值耐受性测定结果的曲线图。曲线图示例参见附录B。

当萘色谱峰的保留时间、拖尾因子及柱效等3个参数中任意一个参数的变化不小于15%时，结束测定工作；或者当老化时间达到120h时，即使上述变化均小于15%，也结束测定工作。

高pH值耐受性测定结果应有的曲线