（高效液相色谱柱）100%水耐受性的测定

一一

来源：GB/T32268-2015十八皖基键合相(C18) 高效液相色谱柱性能测定方法

7.11 100%水耐受性的测定

7.11.1老化条件

老化流动相：水；

柱温：40℃；

流速：参考附录A；

老化时间：4.0h。

7.11.2测试用溶液的配制

称取50.0mg尿苷，溶解于水并定容于100.0mL的容量瓶中，作为储备液。另取1.0 mL储备液，用甲醇定容至10.0mL的容量瓶，得到100%水耐受性测试用溶液。

7.11.3以尿苷为测试对象时的柱效测定条件

流动相：水；

流速：参考附录A；

检测波长：254nm；

柱温：30℃；

进样体积：参考附录A。

7.11.4测定步骤

按7.11.3的条件预先测试一只C18 HPLC柱的柱效，然后用水为流动相老化C18 HPLC柱4h，停止泵。至少15min后启动泵，进样100%水耐受性测试用溶液，等待色谱图中最后一个色谱峰全部出现完，至少1.0min后，停止本次检测。记录色谱图中各色谱峰的保留时间数值（需精确到0.01min)、尿苷的拖尾因子和柱效，以老化后测得结果减去老化前测得的结果，计算得到Δt尿苷、Δtf尿苷、Δn尿苷。

重复测定3次，取测定结果的平均值。