色谱柱知识点5

一一

疏水性：表示固定相与待测组分中疏水集团的作用能力，与硅胶表面积和烷基覆盖率有关。
永久离子交换位点：指在任何pH范围内，固定相中可与待测组分发生静电作用的最少位点。
谱带展宽
在样品或被测物谱带到达检测器之前，将通过色谱系统的多个组成单元，这都将使色谱谱带失真并加宽。这种现象称为谱带展宽。
手性物质：一个物体如与其镜面反射影像不能经过后相互重迭，则称其为手性物质；若能相互重迭则称其为非手性物质。同样，如若一个分子与其镜面反射影像并不能够经过平移后相互重迭，那么就称其为手性分子；否则称其为非手性分子。
手性固定相：通过化学的方式（即生成化学键）或物理的方式将手性识别剂固载到载体上，就可以得到手性固定相。
硅胶的制备方法：物理制硅胶的方法是将块状硅胶通过碾磨等方法破碎而获得，但物理法不仅获得硅胶大多为非球形，且所需器械
耗能较大。相比之下化学法更能获得粒径大小可以控制，较为纯净的硅胶球，化学法主要可以分为四大类：两相法，喷雾干燥法，生物微法，溶胶-凝胶法和堆砌硅珠法
二氧化硅官能团的改性：二氧化硅微球因具有化学稳定性好，机械强度高，粒径分布窄等特点而成为应用最广泛的无机液相色谱柱固定相。为了达到有效提高分离效率和改善分离性能的目的，二氧化硅通常要进行各种官能团的表面功能化改性，常用的改性官能团有十八烷基，辛基，苯基，氨基，氰基等。然而，常规的二氧化硅修饰改性过程复杂而又耗时，通常包括二氧化硅的预处理，偶联剂的引入以及目标修饰试剂的嵌入等多个步骤。此外，改性过程中常用的硅烷偶联剂往往具有一定的毒性并且对水敏感，需要严格控制在无水条件下使用，这些因素又会造成环境污染等问题，大大限制了其应用。
硅胶的物理化学性质
硅胶的主要成分是二氧化硅，其化学结构中均含有Si-O键，每个硅原子周围各有四个氧原子，形成[SiO4]+的正四面体结构单元，而Si-O键是所有Si-X键中最稳定的化学键，从而使硅胶有良好的化学稳定性。因为硅胶所具有的这种特殊的化学结构，暴露于硅胶表面的硅原子倾向于和氧原子的四面体配位，通常以结合单价羟基，即形成表面硅羟基来完成这种配位。硅羟基具有较强的反应活性，其存在使得硅胶表面易于进行功能化改性，这是硅胶可以广泛应用于高效液相色谱固定相基质材料的基础。硅胶表面的化学性质，如硅羟基的存在形式、数目和分布情况等，因为制备方法和处理条件的不同而有所变化。表面硅羟基一般有三种存在形式：孤立或自由硅羟基、孪位硅羟基或者邻位硅羟基。其相互之间的转化如图1.2所示[]，水合硅胶的表面一般存在三种类型的硅羟基，其浓度和性质取决于制备硅胶载体的方法。当温度升到200°C以上时，氢基化的硅羟基会脱水生成硅氧烷基，而当水过量时，又可还原为氢基化的硅羟基。在400°C以上的温度时，游离的硅羟基才能发生氢基化，继而脱水生成硅氧烷基。当热处理温度高于800°C时，硅胶表面的硅羟基则大部分不再存在，失去了功能化改性的价值。


硅胶键合填料的制备
二氧化硅基质填料之所以在高效液相色谱领域得到广泛的应用，就是因为其表面含有丰富的硅羟基（Si-OH）易于功能化改性。根据硅球表面所键合基团的不同，得到的色谱柱填料可以应用于不同的分离模式。目前，用以制备硅胶键合相的途径一般有三种：涂层法，整体修饰法和硅球表面的化学修饰法。
碳覆盖率：与基体物质相连的键合相的量
封端：键合步骤之后,用短链将裸露的硅羟基键合后封闭起来
硅胶纯度：填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度
极性


死体积：狭义上指的是色谱柱中未被固定相占据的空隙体积，即色谱柱内流动相的体积。广义上的死体积是指进样位置（进样口）到检测位置（检测器流通池）这一段的体积（PS:除去色谱柱中填料体积），一旦色谱柱连接，这段体积（图示橙色管路）是不变的（死的）。