梯度洗脱、等度洗脱

一一

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1.梯度洗脱定义在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比。2.梯度洗脱举例

• 梯度，0-5min 乙腈由70%上升到90% 5-10min乙腈由90%上升到100%
• 某分析项目末端梯度洗脱以洗掉过剩的衍生试剂（末端梯度：39-40min有机含量由38%升高到80%，保持10min）
  

2.梯度洗脱的应用
通常情况下，液相色谱操作中的流动相组成和比例是恒定的，这种洗脱化合物的方式被称为等度洗脱，但是为了改善分析结果，某些操作需要连续改变流动相中各溶剂组分的比例以连续改变流动相的极性，使每个分析组分都有合适的容量因子K，并使样品中的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。
梯度洗脱可在下列情形中发挥重要作用。

• 在等度下具有较宽K值的多种样品分析；
• 大分子样品分析
• 样品含有强保留的干扰物，在目标化合物出峰后设置梯度洗脱，将干扰物洗脱出来
• 单组分化合物方法建立时，不知道其洗脱情况，使用梯度洗脱，找出其较优的洗脱条件。