25-羟基维生素D检测（液相色谱-串联质谱）

一一

预期用途
25-羟基维生素 D 测定用于通过在临床分析仪上定量测量和组合 25-羟基维生素 D3 和 25-羟基维生素 D2 来测定人血清和血浆中的 25-羟基维生素 D 总量(25-OH 维生素 D)。这种液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析用于辅助评估维生素 D 的充足性。
25-羟基维生素 D 内标物用于校正由于样品制备、色谱和检测过程中的变化而导致的系统和随机误差，从而确保临床分析仪上分析的准确性。在样品制备方法中，内标也用作沉淀剂。
测试的总结和说明
维生素 D 是一种脂溶性类固醇激素原，主要在皮肤中由 7-脱氢胆固醇光化学产生。
维生素 D 的两种形式在生物学上是相关的:维生素 D3(胆钙化醇)和维生素 D2(麦角钙化醇)。维生素 D3 和 D2 都可以从食物或补充剂中吸收，例如从富含脂肪的鱼类中吸收维生素 D3，从植物和其他营养来源中吸收维生素 D2。饮食摄入是维生素 D 的最小来源，主要来源是阳光对皮肤的作用
维生素 D 的主要储存形式是 25-OH 维生素 D，与 25-(OH)维生素 D 的活性形式相比，其在血液中的浓度高达 1000 倍。因为 25-OH 维生素 D 的半衰期为 2 - 3 周。
流行病学研究表明，维生素 D 不足和缺乏症在全球普遍存在。维生素 D 状态的测量为预防和治疗干预提供了机会。维生素 D 缺乏是继发性甲状旁腺功能亢进和导致骨代谢受损的疾病(如佝偻病、骨质疏松症和骨软化症)的原因。血液中 25- OH 维生素 D 浓度降低(维生素 D 不足)会增加许多慢性疾病的风险，包括常见的癌症、自身免疫性疾病或传染病或心血管疾病。
标 本 收 集 和制备
所有生物样本必须被视为具有潜在传染性，并进行相应处理。
使用人血清和血浆，包括在分离管中收集的血清和血浆。建议禁食样品，但不是必需的。血液应通过静脉穿刺无菌采集到任何推荐的导管类型中。遵循试管制造商关于血清和血浆采集试管的处理说明。重力分离不足以制备样品。颗粒物质可能会干扰检测。
如果在标本采集后 7 天内进行分析，标本可在室温(18-25°C)下保存；否则，标本应冷藏(2-8°C)30天或冷冻(-20°C)1 年。如果标本冷冻保存，在测试前充分混合解冻的标本。避免反复冻融循环。
样 本 限 制
以下类型的标本不适合分析:
 热失活的
 合并的
 明显的微生物污染
 尸体标本或任何其他体液
 严重溶血(> 500 毫克/分升血红蛋白)
 高脂血症样本(胆固醇> 500 毫克/分升或甘油三酯> 3000 毫克/分升)
 含有颗粒物质的标本
为了获得准确的结果，标本应不含纤维蛋白、红细胞和其他颗粒物质。由于凝块形成不完全，接受抗凝或溶栓治疗的患者标本可能含有纤维蛋白。
不要使用已经热灭活的标本，显示明显的微生物污染迹象，如变色或气体形成，或除外周血以外的体液标本。
使用个人防护设备，处理所有生物样本，就像它们具有传染性一样。避免标本之间的交叉污染。
为了获得最佳结果，请检查所有样品是否有气泡。分析前用移液器吸头去除气泡。对每个样本使用新的移液器吸头，以防止交叉污染。
如果在样品杯中，样品在仪器中最多可保存 2 小时，在原始样品试管中最多可保存 4 小时。