色谱图、液相色谱、基线、峰高、保留值（死时间）

一一

色谱图

1.相关定义

• 色谱图：指色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号随时间分布的图象。色谱图的纵坐标为检测器的响应信号，横坐标为时间、体积或距离。
• 基线：色谱柱中仅有流动相通过时，检测器响应讯号的记录值，稳定的基线应该是一条水平直线。
• 峰高：色谱峰顶点与基线之间的垂直距离。
• 保留值（死时间）：不被固定相吸附或溶解的组分进入色谱柱时，从进样到柱后出现浓度最大值所需的时间。
  
  

2.液相色谱不能由色谱图直接给出未知物的定性结果，而必须由已知标准作对照定性。当无纯物质对照时，定性鉴定就很困难，这时需借助质谱、红外和化学法等配合。

3.从色谱图上，可以得到很多重要信息：

• 根据色谱峰的个数，可以判断样品中所含组分的最少个数；
• 根据色谱峰的保留值（或位置），可以进行定性分析；
• 根据色谱峰的面积或峰高，可以进行定量分析。
• 色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据；
• 色谱峰两峰间的距离，是评价固定相和流动相选择是否合适的依据。
  

色谱图举例

1.糖化血红蛋白色谱图

2.乳酸色谱图

乳酸中的苯甲酸和山梨酸测定

色谱柱：C18柱   流动相：甲醇-（0.02M乙酸铵）10-90   检测器：紫外 （236 nm）   

流速：1.0 ml/min      进样量：10μl

组分：1. 乳酸  2.苯甲酸  3.山梨酸

3.杂醇油 HPLC 曲线

色谱柱：C18   流动相：乙腈-水（40-60）   

流速：  1.0 ml/min   进样量：5μl

组分： 1. 乙醇  2..丙醇 3.丁醇  4.戊醇 5.己醇